CRISPR DIY概述

在建立敲入细胞系之前，你需要进行一些基因组分析，以确定Cas9切割位点的理想位置，并设计供体DNA进行重组，将HiBiT标签插入所需的基因组位置。以下是您将遵循的基本步骤，以及有关该过程的更详细指导。

1. 设计并订购你的指导RNA，供体DNA和Cas9。
2. 获得权利合成HiBiT标签。
3. 与寡头供应商合作获得所需材料。
4. 执行基因编辑步骤，将HiBiT标签添加到感兴趣的目标。
5. 分析细胞池或进行克隆分离。

表达细胞内LgBiT蛋白进行HiBiT分析，可以实时测量内源性调控的HiBiT标记蛋白的丰度，以及使用补充的HiBiT作为NanoBRET中的能量供体™ 更多分析可能性的应用。bob娱乐平台下载

• 对HiBiT标记的蛋白质进行活细胞动力学分析；无需细胞裂解
• 与外源或内源表达的HiBiT融合蛋白相容
• 利用HiBiT作为活细胞纳米粒的能量供体™ 应用bob娱乐平台下载

有几种工具可用于将细胞内LgBiT合并到CRISPR/Cas9 HiBiT敲入工作流中。

了解一种简单有效的CRISPR介导的HiBiT标记方法，该方法不需要分子克隆步骤，只需24小时即可完成从基因编辑到内源性生物学的分析

探索如何用简单的发光信号检测和量化任何标记的蛋白质，并了解应用程序和检测格式选项。bob娱乐平台下载

全面讨论了蛋白质标签敲入的方法，以及测定内源性蛋白质功能的分析结果。