CRISPR DIY概述

在创建敲入细胞系之前，您需要进行一些基因组分析，以确定Cas9切割位点的理想位置，并设计供体DNA，以重组将HiBiT标签插入所需的基因组位置。以下是您将遵循的基本步骤，以及有关流程的更详细指导。

1. 设计并订购你的引导RNA、供体DNA和Cas9。
2. 获得权利合成HiBiT标签。
3. 与oligo供应商合作以获得所需的材料。
4. 执行基因编辑步骤，将HiBiT标签添加到感兴趣的目标。
5. 检测细胞池或进行克隆分离。

表达用于HiBiT分析的细胞内LgBiT蛋白允许您测量内源性调节的HiBiT标记蛋白质的实时丰度，以及使用补充的HiBiT作为NanoBRET中的能量供体™ 更多分析可能性的应用。bob娱乐平台下载

• 对HiBiT标记的蛋白质进行活细胞动力学分析；不需要细胞裂解
• 与外源性或内源性表达的HiBiT融合蛋白兼容
• 使用补充HiBiT作为活细胞NanoBRET™应用的能量供体bob娱乐平台下载

有几种工具可用于将细胞内LgBiT纳入CRISPR/Cas9 HiBiT敲入工作流。

了解一种简单有效的crispr介导的HiBiT标记方法，不需要分子克隆步骤，从基因编辑到内源性生物学分析只需短短24小时

了解如何检测和量化任何标记蛋白与一个简单的，发光信号，并了解应用和检测格式选项。bob娱乐平台下载

全面讨论了蛋白质标签的敲入方法，以及内源性蛋白质功能测定方法的结果。