冠状病毒SARS-CoV-2检测及分析方法的建立
新的病毒性疾病的出现,包括冠状病毒SARS-CoV-2(covid19)、MERS(2015)和SARS(2003)的爆发,凸显了快速检测和大规模识别目标病毒的必要性。COVID-19大流行也说明了在紧急需要的时候如何加快研发药物治疗或疫苗的研究工作。科学家们迫切需要物资和支持来遏制SARS-CoV-2病毒的传播。
Promega支持科学家研究新兴病毒感染人类和动物的分子机制,并开发准确的检测方法。我们提供协作技术支持、核酸纯化专业知识、扩增产品和标记技术,简化工作流程,加快研究冠状病毒和其他新兴病毒疾病的研究实验室的工作。
CDC COVID-19紧急使用协议选项
Promega Maxwell®RSC 48号和CSC 48号仪器,以及Maxwell®病毒总核酸纯化试剂盒美国疾病控制和预防中心(CDC)的流感SARS-CoV-2(流感SC2)多重分析中是否有授权的RNA纯化选项,可通过FDA的紧急使用授权(EUA)获得。
Promega Maxwell®RSC 48号和CSC 48号仪器,Maxwell®病毒总核酸纯化试剂盒,和GoTaq®探头一步RT qPCR系统美国疾病控制和预防中心(CDC)2019年新型冠状病毒实时RT-PCR诊断小组是否有授权RNA纯化和主混合选项,可通过FDA的紧急使用授权(EUA)获得。
“Promega自豪地支持疾病预防控制中心的快速反应工作和COVID-19检测实验室的授权RNA提取和扩增技术。”
病毒分析用扩增产物
qPCR和RT-qPCR
PCR试剂包括qPCR和RT-qPCR产物用于检测和扩增靶病毒序列。这些试剂广泛应用于病毒学研究。这个GoTaq®探头一步RT qPCR系统是疾病控制和预防中心(CDC)2019新型冠状病毒实时RT-PCR诊断小组的推荐主混合选项。
特快专递™ 直接扩增试剂启用直接PCR,无需事先提取RNA或DNA。这些试剂用于制备用于qPCR或RT-qPCR分析的病毒样品。
SARS-CoV-2废水RT-qPCR试剂盒用于检测预处理废水中SARS-CoV-2病毒RNA,用于人群监测和流行病学研究。
PCR试剂及辅助产品
工具书类
RT-PCR:
戴恩,M。等. (2020)Dianke病毒:从塞内加尔东部蚊子中分离出的一种新中病毒。病毒研究275,2020年1月2日,197802。
阿尔维斯,麻省理工学院。等. (2018)在一只食蟹狐狸(Cerdocyon-thous)中检测到Mamastrovirus 5:扩大野生动物宿主星状病毒的范围。比较免疫学,微生物学和传染病58, 36-43.
检测病毒RNA的qPCR:
蔡,M。等. (2020)病毒蛋白PB2中的R251K替代增加了欧亚禽流感样H1N1猪流感病毒的病毒复制和致病性。病毒12(1), 52.
病毒结构和特征:
威奇特,O。等. (2014)细胞培养中胰蛋白酶对猪流行性腹泻冠状病毒穗融合蛋白的蛋白水解激活。J、 维罗尔。88(14), 7952–7961.
可扩展的病毒核酸提取液
值得信赖的Promega化学公司的病毒核酸纯化产品有手动和自动两种形式,以适应不同的样品处理需求。
除了用于自动纯化1-48个样品的Maxwell®仪器和基于药筒的试剂盒外,Maxwell®HT萃取化学家还提供基于板的96孔格式,可用于高通量液体处理机器人或使用多通道移液器手动执行。我们还提供各种病毒手动提取试剂盒和协议。这些病毒核酸提取化学可以帮助实验室开发冠状病毒(SARS-CoV-2)测试和研究解决方案的冠状病毒-19大流行。
自动病毒核酸提取
Maxwell®仪器与Maxwell®病毒总核酸纯化试剂盒一起使用,每次从多达48个样本中提取病毒核酸。

高通量自动化和手动净化化学
瑞力普™ 病毒TNA Miniprep工具包,定制
准备好了吗™ 病毒TNA-Miniprep试剂盒,可定制,使用旋转柱快速离心处理病毒样品。有关协议示例,请参阅下面提供的应用程序说明。

Maxwell®HT病毒TNA试剂盒,定制
Maxwell®HT病毒性TNA试剂盒使用磁性树脂,便于自动化和使用机器人液体处理器进行分离。该试剂盒也可用于多孔板的人工纯化。例如,在Tecan、Hamilton、Eppendorf和翠鸟机器人上使用Maxwell®HT病毒TNA试剂盒的方案,以及手动净化方案,请查看下面提供的应用说明。
请与我们联系以获取有关价格和可用性的信息。
净化放大和自动化支持
Promega现场支持科学家(FSS)可以帮助实验室实现或优化病毒RNA提取方法的自动化,而不管使用何种仪器平台。
如果你是自动化新手,时间紧迫,或者需要帮助选择和调整病毒核酸纯化方法,我们可以提供帮助。我们提供化学和仪器专业知识,并将与您一起配置您的仪器和优化工作流程,以满足您实验室的需要。
病毒RNA提取应用注意事项
人工净化
瑞力普™ 病毒TNA Miniprep工具包,定制
Maxwell®HT病毒TNA试剂盒
Maxwell®仪器净化
Maxwell®RSC仪器
唾液中的病毒RNA:Oragene-RE-100型;奥拉金OM-505;Oragene或-100;MP+R-2000型;诺根RNA;光谱SDNA-1000
Maxwell®16仪器
工具书类
使用Maxwell®48提取病毒RNA:
杰格,A.S。等. (2018)非洲和亚洲血统的寨卡病毒在垂直传播模式下都会对胎儿造成伤害。被忽视的热带疾病doi:10.1371/期刊。零件号:0007343
尚塔尔·瑞斯肯,C。等. (2019)托斯卡纳、西尼罗河、乌苏图和蜱传脑炎病毒:欧洲新兴嗜神经病毒分子检测的外部质量评估,2017年。欧洲监督。12月12日;24(50): 1900051.

我们致力于支持那些致力于帮助那些受影响最大的人找到解决方案的客户。
如何开发病毒检测
PCR分子检测技术由于其特异性和快速性,已成为病毒检测的首选方法。本文讨论了分析开发过程中需要考虑的关键因素,包括:
- 分析设计中提取、扩增和检测的决策指南
- 参考资料链接,包括2019-COVID引物序列
- 未来病毒检测技术的发展策略
通过适当的计划和研究,实验室可以迅速建立一种可复制的病毒靶点检测方法
病毒研究的报告技术
荧光素酶
荧光素酶报告提供了一种简单方便的方法,用于监测潜在治疗的效果,建立检测病毒抗体的体外试验,以及在动物模型中对病毒进行成像。NanoLuc®荧光素酶的小尺寸使其非常适合创建报告病毒。
Remdesivir(RDV或GS-5734)被用于治疗美国第一例SARS-CoV-2(前身为2019年nCoV)病例。RDV在任何国家都不是一种被批准的药物,但世界各地的一些机构要求RDV帮助抗击SARS-CoV-2病毒。您可以阅读更多关于使用NanoLuc®荧光素酶报告器来支持这项研究的信息在这里.
工具书类
抗病毒候选药物评估:
张,L。等. (2020)α-酮胺类作为冠状病毒和肠道病毒复制的广谱抑制剂。基于结构的设计、综合和活动评估。J、 医学化学. 内政部:10.1021/美国化学学会图9b01828。发布日期(网络):2020年2月11日
谢汉,T.P等. (2020)remdesivir与洛匹那韦、利托那韦和干扰素β联合治疗MERS-CoV的疗效比较。自然通讯11,货号:222。
使用与Nanoluc®荧光素酶融合的病毒蛋白检测血清中的病毒抗体:
王,W。等. (2019)一种新的荧光素酶免疫吸附试验比商业酶联免疫吸附试验在检测人类和动物中的MERS-CoV特异性IgG方面表现更好。生物安全与健康1(3), 134-143.
通过生物发光成像监测病毒分布:
沈,L。等. (2019)高通量筛选和鉴定冠状病毒的有效广谱抑制剂。内政部:10.1128/JVI.00023-19。J、 病毒醇.93(12),e00023-19。
SARS-CoV-2研究、疫苗及治疗进展
报告和细胞健康分析、RT-qPCR和RNA产生系统被研究者广泛应用于研究病毒发病机制的关键方面,包括特征描述病毒:宿主相互作用追踪细胞内的病毒核酸和蛋白质,监测宿主细胞的活力和代谢。
血清学和PCR检测
发展和实施精确的分子和血清学分析是世界各地许多实验室的一个迫切重点。Promega为实验室设计、执行和扩大基于PCR的分子检测提供产品和定制服务,并支持实验室执行血清学分析和研究新的血清学检测方法。

冠状病毒SARS-CoV-2新闻和更新
最后更新日期:2021年1月26日
SARS-CoV-2是一种新型冠状病毒,于2019年底出现,目前是全球大流行的原因。这种病毒对研究人员和公共卫生官员提出了独特而严峻的挑战。随着形势的发展,下面的新闻和文章会定期更新。有关Promega manufacturing在此期间如何响应客户需求的更多信息,请访问这篇文章.