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核酸分析

核酸分析(基因组学)包括DNA或RNA的分离和鉴定,用于诸如基因分型、基因表达分析、表观遗传学分析、微生物组研究等应用。bob娱乐平台下载核酸分析的基础实验方法包括核酸的提取和清理、DNA/RNA的定量、PCR、分子克隆和测序。

简介核酸分析

纯化,定量和DNA和RNA扩增在许多实验室程序在广泛的各种应用中使用的常见的方法。bob娱乐平台下载高品质的核酸从培养的细胞,动物或植物组织,细菌,体液和其他样品类型的萃取是在大多数基因组分析实验关键的第一步。如果所提取的DNA的质量差,所有下游步骤可能受到损害。

在核酸提取和纯化,将样品进步虽然操作的一组共同的:细胞裂解,结算,核酸结合,洗涤和纯化的DNA或RNA的溶出。的纯度和所提取的核酸的产率是用于下游应用如PCR和测序最佳性能的关键考虑因素。bob娱乐平台下载

核酸纯化方法可被设计用于分离用于广泛样本的DNA或RNA,也可用于特定的单个样本类型。大多数DNA纯化试剂盒可以处理多种样品类型,只需稍微改变操作规程,以确保起始物质的完全裂解。对于含有降解DNA或目标核酸浓度较低的更具挑战性的样品类型,可能需要专门的纯化试剂盒。具有挑战性的样本类型包括福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织样本、含有循环无细胞DNA的血浆或血清、法医样本或任何样本数量有限的来源。

一旦核酸被纯化,最下游的测定需要的DNA或RNA的定量在开始之前。核酸定量方法包括在260nm波长测量荧光DNA或RNA结合的染料,吸光率的测定,和qPCR。核酸纯度也提供了一个判定点继续进行下游测定或不基于二百三十零分之二百六十零纳米或260/280纳米比率。

实时定量PCR,定量PCR或,是用于检测和基因表达的定量的标准核酸分析工具,以及用于检测特定的DNA序列,包括突变的。标准终点PCR和RT-PCR被用于检测和用于进一步操作,包括通过测序分析AMPLIFY特定的DNA序列。

克隆方法,包括限制性消化,亚克隆,PCR克隆及细菌细胞转化,也仍然广泛用于分子生物学实验室。这些用于核酸的遗传操作的经典方法保持用于基因组分析的重要工具。

下面的资bob官方 到yb4 uk网站源提供了核酸分析方法的深入信息,并链接到每种应用的产品。