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克隆和DNA标记

修饰核酸的工具为亚克隆等许多分子生物学技术提供了基础。对于常规的DNA片段克隆,我们提供了多种限制性内切酶和T4 DNA连接酶。对于细菌转化,我们提供选择的感受态细胞,包括我们独特的单步KRX菌株。

对于其他克隆应用,我们提供T4 DNbob娱乐平台下载A激酶,小牛碱性磷酸酶和其他修饰酶。在RNA转录方面,有T7、SP6和T3 RNA聚合酶。

的DNA / RNA标记物,包括台式和梯的分类使得成功的实验的确认。

介绍克隆和DNA标记

亚克隆是分子生物学基本方法是,用于从一个移动矢量插入到另一个,以获得所需的功能和表征感兴趣的DNA序列。

一种方法来完成的DNA的插入物的用途限制酶转移到消化两个片段和靶载体,其通常是一个质粒。成功消化的确认是通过比较用DNA标记片段消化的样品的预期大小来实现的。这是通过在按大小琼脂糖凝胶分离DNA片段运行样品来完成。然后T4 DNA连接酶被用于“粘贴”的期望的片段插入到消化的质粒。

下一步是转变。转化带有质粒的细菌是重要的,因为细菌被用作储存和复制质粒的手段。大肠杆菌细胞更可能合并,如果他们的细胞壁被改变,使得DNA能更容易地通过外源DNA。这种细胞被认为是合格的。已成功转化为细胞的选择由抗生素选择感兴趣的质粒完成。

有很多选择,以确认是否传输成功,包括PCR,限制性内切酶或测序消化。一旦确认,重组载体可用于多种应用,例如蛋白表达或RNA的转录。bob娱乐平台下载