我们的网站不完全支持您的浏览器。

我们检测到您正在使用旧版本的Internet Explorer。你的商业经验可能有限。请将浏览器更新到Internet Explorer 11或更高版本。

我们相信本网站可能会为您提供最好的服务:

美国

美国

语言:英语

Promega的饼干政策

我们的网站使用功能性cookies,不收集任何个人信息或跟踪您的浏览活动。当您选择您的国家时,您同意我们可以在您的设备上放置这些功能cookie。

克隆与DNA标记

修饰核酸的工具为许多分子生物学技术如亚克隆提供了基础。对于DNA片段的常规克隆,我们提供了多种限制性内切酶和t4dna连接酶。对于细菌转化,我们提供了一个有活性细胞的选择,包括我们独特的单步KRX菌株。

对于其他克隆应用,我们提供t4dnabob娱乐平台下载激酶、小牛碱性磷酸酶和其他修饰酶。对于RNA转录,T7、SP6和t3rna聚合酶是可用的。

各种各样的DNA/RNA标记,包括工作台和阶梯,能够证实实验的成功。

克隆与DNA标记导论

亚克隆是分子生物学中的一个基本过程,用于将插入物从一个载体转移到另一个载体以获得所需的功能性并表征所需的DNA序列。

一种完成DNA插入转移的方法是使用限制性内切酶来消化片段和靶载体,靶载体通常是质粒。通过比较消化样品的预期大小和DNA标记片段,确认消化成功。这是通过在琼脂糖凝胶上运行样本来按大小分离DNA片段来完成的。然后使用T4 DNA连接酶将所需片段“粘贴”到消化的质粒中。

下一步是转型。用质粒转化细菌很重要,因为细菌是储存和复制质粒的手段。大肠杆菌如果细胞壁发生改变,使DNA更容易通过,那么细胞更容易吸收外来DNA。这种细胞被认为是有能力的。对转化成功的细胞的选择是通过对感兴趣的质粒进行抗生素选择来完成的。

有许多方法可以确认转移是否成功,包括PCR、限制性内切酶消化或测序。一旦证实,重组载体可用于蛋白质表达或RNA转录等多种应用。bob娱乐平台下载