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免疫测定

Promega免疫测定试剂和基于抗体的检测系统包括新型Lumit™免疫测定,以及一种用于传统ELISA或Western印迹技术的一系列初级和二抗和检测试剂。

Lumit™免疫测定提供了一种简单且快速替代的常规免疫测定方法,包括夹心ELISA和Western印迹。基于生物发光的方法可以在短短30分钟内完成。我们为研究使用提供了几种类型的Lumit™免疫测定,包括检测蛋白质磷酸化,细胞因子,代谢物或新生儿Fc受体结合的特定试剂盒。Lumit™检测试剂以及用于构建您自己的Lumit™测定的标签套件也可供选择。

我们还提供Lumit™DX SARS-COV-2免疫测定,用于检测SARS-COV-2病毒的抗体存在的体外诊断测试。

目前,Lumit™DX SARS-COV-2免疫测定仅在选择国家/地区提供。

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分析是什么?

免疫测定是基于抗体结合和检测特异性抗原的能力的方便和广泛使用的检测方法。ELISA(酶联免疫吸附试验)和Western印迹技术是常用免疫测定的典型实例。

elisa检测以多种形式在多孔板中进行。在夹心法酶联免疫吸附试验中,抗体被结合到平板表面,用于从血浆或血清等样本中捕获目标抗原。彻底清洗后,加入第二种抗体,它与抗原结合,形成抗体-抗原-抗体的“三明治”。该第二抗体可以用一种酶底物进行标记,从而进行检测,或者可以用一种标记的物种特异性第二抗体(如抗人IgG)进行检测。在其他ELISA格式中,目标抗原可以直接结合到平板上,用于检测样品中存在的抗体。然后使用二级标记抗体检测这些结合抗体。

在酶免疫测定中,与检测抗体连接的酶产生与原始样品中存在的靶抗原量成比例的颜色信号。根据免疫测定格式,可以使用分光光度法或荧光板读取器检测和测量颜色程度。

在蛋白质印迹中,将样品中存在的单个蛋白质在凝胶上分离并转移到硝酸纤维素膜上,然后用指向特定抗原的标记抗体询问。洗涤后,通过由标记的一抗产生的信号(颜色,荧光或化学发光)或二抗体产生的信号(颜色,荧光或化学发光)来观察结合的抗体。

ELISA和Western Blot技术提供特异性,灵敏度和相对易用性的优点。然而,它们是耗时的,涉及许多洗涤和孵化步骤。所涉及的步骤数量也可能导致显着的测定 - 测定变异性。

Lumit™免疫分析不同于Western blot和elisa,它提供了一种免洗、基于生物发光的方法,可以快速、灵敏地检测各种目标分子。Lumit™免疫分析基于NanoLuc®二进制技术(NanoBiT®)。在Lumit™免疫分析中,抗体或抗原分别用NanoBiT®荧光素酶的小亚基和大亚基进行化学标记,分别被称为SmBiT和LgBiT。在目标分子存在的情况下,两个亚基被拉近,使SmBiT和LgBiT形成一个活性酶并产生一个明亮的发光信号,用酶标仪检测。