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免疫分析

Promega公司免疫测定试剂和基于抗体的检测系统包括新颖Lumit™免疫测定,以及在传统的ELISA或Western印迹技术中所使用的范围内初级和次级抗体和检测试剂。

Lumit™免疫提供了一个简单,快捷的替代传统的免疫分析方法,包括夹心ELISA和蛋白质印迹。的基于生物发光方法可以在完成只需30分钟。我们提供了研究使用几种类型Lumit™免疫检测技术,包括特定套件来检测蛋白质磷酸化,细胞因子,代谢物或新生儿Fc受体结合。Lumit™检测试剂和标记试剂盒建立自己的Lumit™试验也可提供。

我们还提供Lumit™Dx SARS-CoV-2免疫分析,这是一种用于检测SARS-CoV-2病毒抗体存在的体外诊断试验。
目前,Lumit™Dx SARS-CoV-2免疫检测仅在美国使用。

什么是免疫?

免疫测定是基于抗体结合的能力方便和广泛使用的检测方法和检测特异性抗原。ELISA(酶联免疫吸附测定)和Western印迹技术通常用于免疫测定的典型实例。

的ELISA是在多孔板的几种格式进行。在夹心ELISA中,抗体结合于板表面和用于捕捉靶抗原从样品如血浆或血清。彻底洗涤后,将第二抗体加入,其结合抗原,产生抗体 - 抗原 - 抗体“夹心”。该第二抗体可与使得能够检测酶底物进行标记,或具有物种特异性标记的第二抗体(例如,抗 - 人IgG),可能被检测到。在其他ELISA形式中,靶标抗原可以直接结合到所述板和用于检测样品中存在的抗体。然后,将这些结合的抗体使用的是二次标记的抗体进行检测。

在酶免疫分析中,与检测抗体连接的酶产生与原始样本中靶抗原数量成比例的颜色信号。根据免疫分析的格式,颜色的程度可以检测和测量使用分光光度法或荧光平板阅读器。

在Western印迹中,样品中存在的单独的蛋白质被分离在凝胶上,并转移到硝酸纤维素膜上,然后将其与针对特异性抗原的标记抗体询问。洗涤后,结合的抗体通过由标记的第一抗体或第二抗体产生的信号(颜色,荧光或化学发光)的发展可视化。

ELISA和Western blot技术提供特异性,敏感性和相对易用性的优势。然而,他们耗时执行,涉及众多的洗涤和孵化步骤。所涉及的步数也可导致显著检测到试验存在差异。

Lumit™免疫测定通过提供一种用于以快速和灵敏的检测格式各种靶分子的无洗涤,基于生物发光的方法从蛋白质印迹和ELISA中是不同的。Lumit™免疫分析是基于NanoLuc®二进制技术(NanoBiT®)。在Lumit™免疫测定,抗体或抗原进行化学NanoBiT®萤光素酶的小和大亚单位,分别称为SmBiT和LgBiT标记。在目标分子的存在,这两个亚基紧密接近,允许SmBiT和LgBiT以形成活性酶和产生明亮的发光信号,该信号用酶标仪检测。