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免疫测定

Promega免疫分析试剂和基于抗体的检测系统包括新型Lumit™ 免疫分析,以及传统ELISA或Western印迹技术中使用的一系列一级和二级抗体和检测试剂。

Lumit™免疫检测提供了一种简单、快速的传统免疫检测方法,包括三明治elisa和Western blot。这种基于生物发光的方法可以在30分钟内完成。我们提供几种类型的Lumit™免疫分析用于研究,包括检测蛋白磷酸化、细胞因子、代谢物或新生儿Fc受体结合的特定试剂盒。Lumit™检测试剂和标记试剂盒建立自己的Lumit™测定也可用。

我们还提供Lumit™ Dx SARS-CoV-2免疫分析,一种体外诊断试验,用于检测SARS-CoV-2病毒抗体的存在。

目前,卢米特™ Dx SARS-CoV-2免疫分析仅在部分国家可用。

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分析是什么?

基于抗体结合和检测特定抗原的能力,免疫分析是一种方便且广泛使用的检测方法。ELISA(酶联免疫吸附分析)和Western印迹技术是常用免疫分析的典型例子。

elisa以多种形式在多孔板中进行。在夹心ELISA中,抗体与平板表面结合,用于从血浆或血清等样本中捕获目标抗原。在彻底清洗后,加入第二种抗体,与抗原结合,形成抗体-抗原-抗体“三明治”。这种第二抗体可以用能够检测的酶底物标记,也可以用标记的种特异性二抗(如抗人IgG)检测。在其他酶联免疫吸附试验中,靶抗原可以直接与平板结合,用于检测样品中存在的抗体。然后用二级标记抗体检测这些结合抗体。

在酶免疫分析中,与检测抗体相连的酶产生与原始样本中存在的目标抗原量成比例的颜色信号。根据免疫分析格式,可使用分光光度计或荧光板读取器检测和测量颜色程度。

在westernblotting中,样本中的单个蛋白质在凝胶上分离并转移到硝化纤维素膜上,然后用针对特定抗原的标记抗体进行检测。洗涤后,通过标记的一级抗体或二级抗体产生的信号(颜色、荧光或化学发光)显示结合抗体。

ELISA和westernblot技术具有特异性、敏感性和相对易用性。然而,它们执行起来非常耗时,涉及许多清洗和培养步骤。所涉及的步骤数量也会导致显著的化验间差异。

Lumit™免疫分析与Western blot和elisa不同,它提供了一种免洗、基于生物发光的方法,以快速和灵敏的形式检测各种目标分子。Lumit™免疫检测基于NanoLuc二元技术(NanoBiT®)。在Lumit™免疫分析中,抗体或抗原用NanoBiT®荧光素酶的大小亚基进行化学标记,分别称为SmBiT和LgBiT。在目标分子存在的情况下,两个亚基被拉近,使SmBiT和LgBiT形成一种活性酶并产生明亮的发光信号,这种信号可以用酶标仪检测到。