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聚合酶链反应

从终点PCR定量实时PCR和RT-PCR,我们提供的高品质产品的完整产品组合,以满足您的需求放大。端点和实时PCR产品具有在方便主混合物,试剂盒和用于基本PCR柔性酶制剂GoTaq®(的Taq)DNA聚合酶,热启动PCR,长PCR范围,定量PCR和RT-qPCR的。

RT-PCR和real-time RT-qPCR产品线包括GoTaq®DNA聚合酶和GoScript™逆转录酶——在存在PCR抑制剂的情况下,为困难模板提供了稳定可靠的逆转录和PCR性能。

所有的PCR系统,酶和试剂都与我们的PCR性能保证。如果你不完全与任何Promega公司的PCR产物满意,我们将发送一个更换或退还您的帐户。

PCR基础知识

PCR,聚合酶链式反应,是核心技术,该技术已经彻底改变了分子生物学。在PCR中,一个DNA分子靶向和复制多次,从而允许与靶DNA序列的指数扩增。

PCR扩增反应的关键部件是一个热稳定的DNA聚合酶,脱氧核苷酸三磷酸(dNTP),反应缓冲液和镁,两种寡核苷酸引物和该允许受控通过多轮DNA变性的反应温度的循环的热循环仪,引物结合和DNA延期。

逆转录PCR(RT-PCR)允许RNA序列的询问。在RT-PCR,RNA靶被第一反转录成DNA,通过PCR扩增之前。

实时定量PCR提供了一个样本更灵敏,定量分析。在qPCR中和RT-qPCR的,标记的反应产物被实时作为扩增反应的进行检测。基于定量PCR的方法是用于定量靶DNA序列或监测基因表达的标准方式。

热稳定DNA聚合酶之间的变化被用于为特定目的优化反应。例如,在热启动PCR,当达到变性温度,直到DNA聚合酶不被激活。这最小化的非特异扩增产物的形成,并允许室温反应设置的便利性。一的用于热启动的反应的最有效的方法可使用的抗体阻断Taq聚合酶的活性来实现。

使用Taq DNA聚合酶和一种缺乏3’-5’外切酶活性的校对酶的混合物可以实现远程PCR,这种酶可以切除合成DNA链中错误结合的碱基。这允许更大的准确性和产生更长的目标序列。Pfu等高保真热稳定性聚合酶错误率低,且具有3 ~ 5’的核酸外切酶活性。