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聚合酶链反应

从终点PCR到定量实时PCR和RT-PCR,我们提供完整的高质量产品组合,以满足您的扩增需求。端点和实时PCR产品的特点是GoTaq®(Taq)DNA聚合酶采用方便的主混合物、试剂盒和灵活的酶制剂,用于基本PCR、热启动PCR、远程PCR、qPCR和RT-qPCR。

RT-PCR和实时RT-qPCR产品线包括GoTaq®DNA聚合酶和GoScript™ 逆转录酶——在有PCR抑制剂的情况下,为困难的模板提供可靠的逆转录和PCR性能。

所有PCR系统,酶和试剂都具有我们的PCR性能保证。如果您对任何Promega PCR产品完全满意,我们将发送替换或退款您的帐户。

PCR基础知识

聚合酶链反应(PCR)是一种革新分子生物学的核心技术。在PCR中,一个DNA分子被靶向复制多次,使目标DNA序列呈指数级扩增。

PCR扩增反应的关键组成部分是耐热DNA聚合酶、脱氧核苷酸三磷酸(dNTPs)、反应缓冲液和镁、两个寡核苷酸引物和一个热循环器,该热循环器允许通过多轮DNA变性、引物结合和DNA延伸来控制反应温度的循环。

逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)允许RNA序列的询问。在RT-PCR中,RNA靶点在PCR扩增之前首先被反转录到DNA上。

实时QPCR对样品提供更敏感,定量分析。在QPCR和RT-QPCR中,随着扩增反应进行,实时检测标记的反应产物。基于QPCR的方法是用于量化靶DNA序列或监测基因表达的标准方法。

热稳定DNA聚合酶之间的变化用于优化特定目的的反应。例如,在热开始PCR中,DNA聚合酶在达到变性温度之前不会有效。这最大限度地减少了非特异性扩增产物的形成,并允许便于室温反应设置。使用抗体来阻止Taq聚合酶活性可以实现最有效的热开始反应方法之一。

长程PCR可以通过使用耐热聚合酶的混合物来实现,例如Taq-DNA聚合酶和缺乏3´-5´核酸外切酶活性的校对酶,其去除合成DNA链中错误结合的碱基。这允许更高的精度和生成更长的目标序列。高保真耐热聚合酶如Pfu具有较低的错误率,并且还具有3′到5′的核酸外切酶活性。