蛋白表达

最经常使用的无细胞表达系统从兔网织红细胞，麦胚和起源大肠杆菌。有两种类型的兔网织红细胞的基于无细胞表达系统的：翻译系统和耦合翻译和转录（TNT®）系统。两者都提供翻译所需的大分子组分，如核糖体，tRNA的，氨酰-tRNA合成，起始，延伸和终止因子。蛋白质合成可以使用mRNA的模板在耦合转录和翻译系统翻译系统或DNA模板（质粒DNA或PCR片段）几个小时来进行。

该T7 RNA聚合酶系统是生产蛋白中最流行的方法大肠杆菌。在该系统中，将含有感兴趣的基因，克隆在T7启动子下游的表达载体，被导入到T7表达宿主。T7表达宿主如DE3菌株具有噬菌体T7 RNA聚合酶基因的染色体拷贝。当一个这样的诱导物IPTG作为或鼠李糖加入到培养物中，T7 RNA聚合酶表达和转录感兴趣的基因，然后通过内源蛋白翻译机器所需的蛋白质的翻译。Promega公司提供现成的使用感受态细胞用于重组蛋白的表达大肠杆菌。