蛋白质表达

最常用的无细胞表达系统来源于兔网织红细胞、小麦胚芽和小麦胚芽大肠杆菌. 有两种基于兔网织红细胞的无细胞表达系统：翻译系统和耦合翻译和转录（TNT®）系统。两者都提供翻译所需的大分子成分，如核糖体、tRNA、氨酰tRNA合成酶、起始、延伸和终止因子。利用翻译系统中的mRNA模板或耦合转录和翻译系统中的DNA模板（质粒DNA或PCR片段），可以在数小时内完成蛋白质合成。

t7rna聚合酶系统是最流行的方法生产蛋白质的细胞大肠杆菌. 在这个系统中，一个包含感兴趣的基因的表达载体，克隆在T7启动子的下游，被导入T7表达宿主。T7表达宿主如DE3菌株具有噬菌体t7rna聚合酶基因的染色体拷贝。当向培养物中加入诱导剂如IPTG或鼠李糖时，t7rna聚合酶被表达并转录相关基因，随后通过内源性蛋白质翻译机制翻译所需蛋白质。Promega公司提供现成的活性细胞，用于在细胞中表达重组蛋白大肠杆菌.