蛋白质表达

最常用的无用的细胞表达系统源自兔网，小麦胚芽和大肠杆菌。基于兔网的无细胞表达系统存在两种类型：翻译系统和耦合转录和转录（TNT®）系统。两者都提供翻译所需的大分子组分，例如核糖体，TrNA，氨基酰基-TRNA合成酶，引发，伸长和终止因子。蛋白质合成可以在偶联转录和翻译系统中使用平晶系统或DNA模板（质粒DNA或PCR片段）中的mRNA模板在几小时内进行。

T7 RNA聚合酶系统是合成蛋白质最常用的方法大肠杆菌。在该系统中，将含有感兴趣基因的表达载体克隆到T7启动子下游，被引入T7表达宿主中。T7表达宿主，例如DE3菌株具有噬菌体T7 RNA聚合酶基因的染色体拷贝。当向培养物中加入诸如IPTG或鼠李酮的诱导剂时，表达T7 RNA聚合酶并转录感兴趣的基因，然后通过内源蛋白翻译机械翻译所需的蛋白质。Promega提供即用型富集细胞，用于表达重组蛋白大肠杆菌。