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蛋白质相互作用

我们提供了许多用于分析蛋白质相互作用的产品,包括下拉测定,基于BRET和互补报告的系统。

基于细胞提取物和/或无细胞表达的传统方法用于GST下拉系统。Halotag®哺乳动物下拉系统用于分离哺乳动物细胞的细胞内蛋白质复合物。

Nanobret™和Nanobit®技术提供了直接分析活细胞中蛋白质相互作用的方法。NaNobRet™系统在基于近距离的测定中使用生物发光共振能量转移(BRET),其通过从生物发光蛋白供体中测量从生物发光蛋白供体中的能量转移来检测蛋白质相互作用。

Nanobit®MaSIASE依赖于基于Nanoluc®Luciferase的双子单元系统,可用于蛋白质:蛋白质相互作用的细胞内检测。亚基与感兴趣的蛋白质融合,形成当蛋白质相互作用时产生明亮的发光信号的官能酶。

蛋白质相互作用的介绍

蛋白质:蛋白质相互作用(PPIs)几乎对细胞的每一个过程都是必不可少的,因此理解PPIs对于理解正常和疾病状态下的细胞生物学是至关重要的。利用细胞提取物或活细胞表达潜在靶点来表征蛋白质相互作用的方法有很多。

在下拉分析中,一个蛋白质伴侣在细胞中表达为融合蛋白(例如诱饵蛋白)大肠杆菌然后用融合标签特异的亲和配体固定。固定化的诱饵蛋白可以与猎物蛋白一起孵育。

共同免疫沉淀是研究蛋白质:蛋白质相互作用的另一种选择。为了进行共免疫沉淀,抗靶蛋白的抗体通过蛋白质A或G偶联至Sepharose®珠子,然后用抗体偶联珠粒免疫沉淀含有靶蛋白的络合物。

然而,这些研究蛋白质间相互作用的传统方法并不能直接在细胞环境中提供数据。利用生物发光共振能量转移(BRET)或互补分析,可以定量测定活细胞中蛋白质间的相互作用。