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蛋白质纯化

蛋白质纯化的蛋白质功能的研究基础,并包括一系列的流程来表达,丰富和从复杂混合物提纯感兴趣的蛋白质,如细胞裂解液。用于此目的的最快和最有效的方法是亲和纯化。我们使用的亲和标签,如HaloTag,GST-或His标签纯化重组蛋白提供了一系列蛋白纯化试剂盒和试剂。我们还提供Magne®蛋白G / A珠子,其用于从血清多克隆和单克隆抗体的纯化提供了一种易于使用和快速的方法,腹水和细胞培养基。

蛋白质纯化基础

蛋白质纯化是分析单个蛋白质和蛋白质复合物的基本步骤。由于使用方便、细胞生长快、培养成本低,大肠杆菌仍是许多研究者生产重组蛋白的首选。在大肠杆菌中表达的蛋白质可以相对高的数量被纯化,但是这些蛋白质,特别是真核蛋白质,可能不会表现出适当的蛋白质活性或折叠。培养的哺乳动物细胞提供了一种选择,以生产适当折叠和功能的哺乳动物蛋白质,适当的翻译后修饰。

为了简化纯化,亲和纯化标签可以融合到感兴趣的重组蛋白。常见的融合标签添加至重组蛋白的N-或C-末端的多肽,小蛋白质或酶。在重组蛋白的纯化的第一步是细胞裂解物或上清液的制备。对于分泌的蛋白质,最小上清液制备是必需的,然后进行选择性结合纯化的蛋白质,洗涤和洗脱。纯化后,蛋白质可以用蛋白酶,以除去亲和标签被切割。