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蛋白质纯化

蛋白质纯化是研究蛋白质功能的基础,它涉及到从细胞裂解物等复杂混合物中表达、富集和纯化所需蛋白质的一系列过程。最快和最有效的方法是亲和纯化。我们提供一系列蛋白质纯化试剂盒和试剂,用于使用亲和标签(如HaloTag、GST-或His标签)纯化重组蛋白质。我们还提供Magne®蛋白G/A珠,它为从血清、腹水和细胞培养基中纯化多克隆和单克隆抗体提供了一种简便、快速的方法。

蛋白质纯化基础

蛋白质纯化是分析单个蛋白质和蛋白质复合物的基本步骤。大肠杆菌因其使用方便、细胞生长迅速、培养成本低等优点,一直是许多研究人员生产重组蛋白的首选。在大肠杆菌中表达的蛋白质可以得到相对高数量的纯化,但是这些蛋白质,特别是真核蛋白,可能不会表现出适当的蛋白质活性或折叠。培养的哺乳动物细胞提供了另一种选择,通过适当的翻译后修饰产生正确折叠和功能的哺乳动物蛋白质。

为了简化纯化,亲和纯化标签可以融合到感兴趣的重组蛋白。常见的融合标签是多肽,小蛋白质或添加到重组蛋白的N-或C-末端的酶。纯化重组蛋白的第一步是制备细胞裂解物或上清液。对于分泌的蛋白质,需要最小的上清液制剂,然后选择纯化蛋白的选择性结合,洗涤和洗脱。纯化后,蛋白质可以用蛋白酶切割以除去亲和标记。